赵高听说李斯对自己专权有不满的言论，就设计使李斯接二连三地触怒二世，又在二世面前说李斯的坏话。二世就派赵高审理丞相一案，对他加以惩处，查问李斯和儿子李由谋反的情状，将其宾客和家族全部逮捕。赵高惩治李斯，拷打他一千多下，李斯不能忍受痛苦的折磨，冤屈地招供了。李斯之所以不自杀而死，是他自负能言善辩，又对秦国有大功，确实没有反叛之心，希望能够上书为自己辩护，希望二世能觉悟过来并赦免他。于是奏书列数自己的七条罪状，实际是列数自己对秦的功绩。书呈上之后，赵高让狱吏丢在一边而不上报，说：“囚犯怎能上书? ”

二世二年 (前208) 七月，李斯被判处五刑，判在咸阳街市上腰斩。李斯出狱时，跟他的次子一同被押解，他回头对次子说：“我想和你再牵着黄狗一同出上蔡东门去打猎追逐狡兔，又怎能办得到呢! ” 于是父子二人相对痛哭，三族的人都被处死了。

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