20世纪20年代，一些知识分子成立了早期的民族主义组织。1920年，约有20个非洲学生和黑白混血学生在里斯本成立了“非洲人同盟”(也称“非洲联盟”)，主张加强非洲人的团结。虽然它的力量很弱，但在殖民地却有着很大的反响。20世纪20年代初，在莫桑比克建立了“非洲同胞会”，后来演变成为“非洲人协会”。30年代初，非洲人协会中比较坚决的民族主义分子分裂出来，组成“黑人之友会”(也称“亲黑人协会”)。这个组织后来改名为“莫桑比克黑人联盟中心”。此外，在莫桑比克出生的欧洲人也组织相应的协会。起初只是为了保护白人的利益，后来也反对种族歧视和偏见。

20世纪20—30年代，掀起了以同化人为主导的文化复兴运动。这一运动的参加者反对依附于葡萄牙文化，致力于研究本国的历史和现状，以期发现民族主义的传统。20年代创建的《非洲呼声》周刊，为具有反抗精神的黑人和混血种人知识分子提供了阵地。

第二次世界大战结束后，葡萄牙为了巩固自己的殖民统治，于1951年宣布莫桑比克为葡萄牙的海外省。1961年，宣布“文明”和“不文明”者享有平等权利。1962年，宣布废除强迫劳动。同时，殖民当局却加强法西斯统治。葡萄牙继续向莫桑比克大量移民，并且增加投资，控制经济命脉。随着美国资本和南非资本实力在莫桑比克的增长，葡萄牙在莫桑比克的殖民统治得到加强。

莫桑比克人民反对葡萄牙殖民统治的斗争，在第二次世界大战结束后快速发展起来。广大工农群众积极加入斗争。早在1925年，运输工人和码头工人就举行过罢工，20世纪30年代中，洛伦索—马贵斯的码头工人曾多次举行罢工。1947年，码头工人和种植园工人分别罢工。1948年，洛伦索—马贵斯发生起义。1949—1951年，码头工人多次罢工，斗争激烈。1956年，码头工人罢工中，有49人英勇牺牲。1960年，木韦达地区的农民举行示威，抗议警察逮捕合作社领导人，遭到镇压，被打死500多人。1961年，人民群众同殖民军队不断发生冲突。

20世纪60年代初，一些民族主义组织先后成立。1960年10月，流亡在罗德西亚和尼亚萨兰的莫桑比克人在阿德·利诺·格万贝的领导下，组成了“莫桑比克民主联盟”;1961年4月，该联盟将总部迁到达累斯萨拉姆。1961年2月，在肯尼亚的蒙巴萨，成立了“莫桑比克非洲民族主义者联盟”。它的成员是流亡在肯尼亚、乌干达和坦噶尼喀的莫桑比克人。这个组织的创始人是马太·姆莫莱和马利安加。后来，它的总部也迁到达累斯萨拉姆。来自太特地区的莫桑比克流亡者组织的“争取莫桑比克独立非洲民族联盟”，也在1961年迁到达累斯萨拉姆。

1962年6月，莫桑比克民主联盟、莫桑比克非洲民族主义者联盟和争取莫桑比克独立非洲联盟3个组织合并，成立了“莫桑比克解放阵线”，由爱德华多·希万博·蒙德拉纳担任主席。莫桑比克解放阵线主张进一步加强莫桑比克人的团结，争取莫桑比克的独立。1963年，洛伦索—马贵斯、贝拉港和纳卡拉等地爆发罢工，但是遭到残酷镇压。莫桑比克解放阵线认为温和的政治行动不会带来独立。

1964年9月，莫桑比克解放阵线的武装力量袭击德尔加多州的一些军事和行政机构，发动了反对葡萄牙殖民统治的武装斗争。接着，游击战争扩大到尼亚萨州、赞比西州和太特州。为了建立巩固的根据地，解放战线撤走了在赞比西州和太特州进行活动的部队，集中到尼亚萨州和德尔加多州，把这2个州牢牢控制在自己的手里。武装斗争开始时，解放阵线受过训练的武装人员只有250人，分成10—15人的小队进行游击活动。到1965年，发展到以联队为单位进行活动。1966年，又将各个联队组成一些营。到1967年，受过训练的解放阵线武装部队已发展到8000人，还不包括民兵和新兵在内。这时，解放阵线的武装部队已经能够进行较大规模的斗争，袭击行政中心，解放整个地区。到1967年年底，解放阵线的武装部队已经解放了莫桑比克1/5的国土。1968年7月，莫桑比克解放阵线在尼亚萨州解放区召开了第二次代表大会。大会通过了一系列决议，坚决表示：“莫桑比克人民不断地走武装斗争的道路，要为独立而战斗到底。”

在莫桑比克民族解放斗争发展过程中，同时进行活动的民族主义组织还有“莫桑比克革命委员会”。这个组织是1965年6月成立的，总部设在赞比亚的卢萨卡。它的党章党纲规定，领导人民进行斗争，争取真正的、彻底的、无条件的独立。莫桑比克革命委员会领导下的爱国者，于1966年和1967年在尼亚萨州、太特州等地开展武装斗争。1968年，他们在太特州的宗博、卡林迪等地也有过活动，但是规模较小。

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